血红蛋白的提取和分离

分离原理

蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等，可以用来分离不同种类的蛋白质

凝胶色谱法

-概念

也称分配色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法

原理

凝胶是微小的多孔球体，这些小球体大多数是由多糖类化合物构成的，如葡聚糖或琼脂糖

在小球内部有许多贯穿的通道，当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢

而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快

相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离

-过程

蛋白质混合物上柱

-洗脱开始

洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动

相对分子质量较小的蛋白质扩散进入凝胶颗粒内，相对分子质量较大的蛋白质被排阻于颗粒之外

相对分子质量较小的蛋白质被滞留，相对分子质量较大的蛋白质向下移动

相对分子质量不同的分子完全分开

相对分子质量较大的蛋白质已从层析柱中洗脱出来，相对分子质量较小的蛋白质还在行进中

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