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洗板:同前

2015-5-5 来源：不详浏览次数：次

2. 洗涤过程很关键

2瓶

2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干

4. 本试剂盒宜置4oc冰箱保存

20×浓缩洗涤液(wash buffer)

结果计算与判断

来源:上海西唐生物科技有限公司

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值

5. 本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断!

3. 板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥洗涤不充分将导致精确度误差及od值错误地升高

检测程序

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul将反应板充分混匀后置37℃60分钟

12ml

3. 重复性:板内、板见变异系数均小于10%

标准品(standards):2000%/瓶

试剂盒组成(2-8℃保存)

1. 所有od值都应减除空白值后再行计算

50ml

1.收集标本:血清、血浆(edta)、细胞培养上清液、组织匀血红蛋白155浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融血清测定前用标本稀释液作1:20倍稀释

4. 洗板:同前

12ml

8. 每孔加入100ul终止液混匀

(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)

4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)

联系电话:021-9873

12ml

7. 每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟

第一抗体工作液(biotinylated antibody)

6. 洗板:同前

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul将反应板置37℃30分钟

终止液(stop solution)

10×标本稀释液(sample buffer)

准备试剂与收集异常血红蛋白病血样

本实验采用双抗体夹心abc-elisa法用抗大鼠hba1c单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的hba1c与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠hba1c,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在450nm处测od值,hba1c浓度与od值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中hba1c浓度

2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成2000%的溶液设标准管8管,第一管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul在第一管中加入2000%的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去第八管为空白对照

2.血红蛋白e病特异性:可同时检测重组或天然的大鼠hba1c不与大鼠其它细胞因子有交叉反应

底物工作液(tmb solution)

96孔

1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟

原理

酶标板(coated wells)

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线

酶标抗体工作液(enzyme conjugate)

12ml

试剂盒性能

e-mail:westang@163. com