血脂血红蛋白胆红素对实验室血检的干扰
2017-9-13 来源：不详 浏览次数：次本文讨论的干扰是指油脂，游离血红蛋白以及胆红素（也包括球蛋白，药物）这些可以影响临床病理检测的物质。它们被当做干扰因为在多方面直接干扰了检测程序和结果，也被当做分析前因素，因为一些物质（油脂，游离血红蛋白，药物）在某些范围内是可控的，样本采集和处理时可以将其影响降至最低。在本节中，我们将介绍临床病理检验最常见的三种的干扰：脂血，溶血，黄疸，以及这些干扰对血液和生化检测结果潜在影响的简单总结。这些变量对临床病理测试的影响取决于采用的检测方法（对于所有检测都是，包括止血检测）。
脂血
脂血（乳糜状）由甘油三酯（如乳糜微粒或极低密度脂蛋白）增加产生。脂血通常是进食后造成的血样误差（即非禁食动物中收集的血液），采血前可将动物禁食（禁食不短于12小时）将误差最小化。如在禁食下血样仍有脂血症则表明存在潜在疾病，例如：糖尿病，胰腺炎，肝脂沉积（马），肿瘤（马）。
血液常规检测干扰
脂血通过光散射干扰血常规检测。会影响以下结果：
血红蛋白和血红蛋白相关指数：血红蛋白吸光度升高，导致测量数值的偏高。通常也会影响MCH(红细胞平均血红蛋白量)和MCHC(红细胞平均血红蛋白浓度)的数值偏高，所以应该将结果作废。康奈尔大学的血液分析仪通过激光散射直接测量RBC中血红蛋白含量（CH红细胞血红蛋白含量和CHCM红细胞血红蛋白浓度），在很大程度上可以解决该干扰。脂血样品中，当脂血导致标准血红蛋白（MHC，MCHC）测量错误偏高时，我们通常选取分析仪报告中这些值（血红蛋白量，CH，CHCM）进行评估。
折射计测定总蛋白：脂质会使光线发生折射，使用这种方法会使总蛋白测定值偏高。
血小板数量：在一些脂血样本中，大的脂类分子可能被分析仪错误的当成血小板，从而错误的增加血小板数量。
生化检测干扰
血脂通过以下机制干扰生化检测。
光散射：可导致某些分析物吸光度读数虚假升高，特别是那些不是空白的末端反应，例如会导致胆红素高度浓缩。干扰对于分析物的影响取决于测量方法。
血容量改变/溶剂排斥：可导致某些分析物的检测值偏低。例如，电解质（主要是钠和氯，钾也可能发生）。大颗粒（脂质，蛋白质）化学成分占据样本体积。
溶血：脂血会加速红细胞的溶血。将影响单个检测的结果（尤其是在非空白分析物（未设空白组？）的反应终点处）。分析仪检测反应终点的分析物，该波长处的血红蛋白也被同样吸收，使分析物检测值偏高。在康奈尔大学，我们通过冷藏样本并将其高速离心，在试管的最上端形成一层脂肪层。以此减少因脂血导致的实验室结果误差。从管内吸取位于脂肪层下面的少脂质的血浆用于检测分析。化学清除方法不可靠可能会在其他方面影响实验室结果。所以一般不会清除脂质血浆，值得注意的是，须采用全样品进行甘油三酯检测，如果脂肪层不包括在分析中，将测得检测值偏低。
溶血
溶血通常是由于静脉穿刺技术不当，脂血，冷冻血液样本，未及时离心，样本送检延迟，特定抗凝血剂（氟化物-草酸盐）等多种因素而导致的一种体外人工误差。即使血样的储存和处理方法正确，但脂血样本中红细胞的脆性大，也更容易溶解。然而，因为某种类型的溶血性贫血（焦虫感染，氧化损伤），溶血也可以发生在体内（血管内溶血）。人工造成的红细胞裂解与血管内的溶血相似，所以比较难区别体内外溶血（特别是在实验室中，我们检测的是样品而非患者）。如果动物贫血且具有血红蛋白尿，就是血管内溶血，即病理性溶血性贫血。血红蛋白氧载体（例如Oxyglobin血液增强剂）是红色的，这将明显干扰化学分析仪。
血常规检测干扰
溶血通过破裂的RBC和光散射机制干扰血液学测试，会影响以下结果：
HCT（血细胞比容），PCV（红细胞压积）,RBC数量：因为破裂的红细胞未被仪器计算在内，导致PCV的检测值偏低（HCT取决于RBC数量）。
血红蛋白相关指数：因为自动分析仪不会将破裂的红细胞计算到血红蛋白里，所以体内外溶血与否，血红蛋白的测定量都相同。人为因素造成的体外溶血中，血红蛋白是动物携氧能力最准确的测定，并可以通过血红蛋白的三倍来估计HCT（因为红细胞的1/3是血红蛋白）。而当动物体内确实存在血管内溶血时，HCT、RBC或PCV数值能更准确的反应动物的携氧能力，破裂的红细胞不能携带氧。不管怎样，溶血都将导致相对于HCT和RBC的血红蛋白含量会虚高，与这些检测结果有关的MCH和MCHC也会偏高，可能会作废。MCV直接通过自动分析仪测定，所以不会受溶血的影响（除非通过PCV计算MCV的值）
折射仪测定总蛋白：溶血使折射计中的光线模糊，使其难以读数。血红蛋白作为蛋白质对折光率测量可能也有影响。
血小板计算：溶血样本中，分析仪可能将血影细胞认成血小板，错误增加血小板数量。
生化检测干扰
溶血通过如下机制干扰生化检测
增加吸光度：释放的血红蛋白将增加血红蛋白光谱范围内的吸光度。许多生化反应的基础是测量血红蛋白光密度的吸光度变化。这可以通过动力学反应（能够测量吸光度的变化速率）或忽略端终点反应（其受溶血影响最大）来抵消。
限制反应：释放的血红蛋白可以直接限制化学反应。
细胞成分释放：红细胞内高浓度的酶或其他成分因溶血进入血清，导致某些检测值增高（例如马和如秋田犬，柴犬等亚洲犬种体内的钾，AST，LDH，镁，可能还有铁）。值得注意的是溶血时，磷酸盐含量会增加，因为在此期间有机磷会转化成无机磷（储存使用）。
酶释放：参与化学反应的酶释放也会干扰，例如腺苷酸激酶会增高血清中CK（肌酸激酶）的活性。
水释放：红细胞中的水份会稀释血清成分。
溶血对于检测结果的影响具有物种依赖性。
电泳干扰
血红蛋白可以在早期β区中迁移，导致β球蛋白部分增加。血红蛋白-触珠蛋白复合物也可以在这个区带中迁移。如果严重溶血时，在该区带（具有一定宽的范围）中可以检测到与单克隆样几乎相同高的波峰，可能被误认为单克隆免疫球蛋白。
黄疸
黄疸对于血液常规检测结果影响不大，包括量测折射法检测的血浆蛋白。
生化检测干扰
胆红素造成的干扰源于其光谱性质以及与其他试剂发生化学反应的能力（导致分析物测定值降低）。尤其影响肌酸酐的测定浓度。
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